器官发生与植株再生调控培养；愈伤组织增殖培养

器官发生与植株再生调控培养；愈伤组织增殖培养

实验准备：
配制器官分化和愈伤组织诱导培养基。
培养基配方：分化培养基—MS基本培养基附加2.0mgl-1BA、和0.5mgl-1NAA。愈伤组织增殖培养基—MS基本培养基附加2.0mgl-1BA、和2.0mgl-1NAA。

3.1 实验目的
观察和分析不同光照条件形成的愈伤组织对器官分化的影响，观察和分析愈伤组织诱导和器官分化的激素使用差异；了解器官分化和植株再生的过程。掌握离体培养中的转接技术。

3.2 实验材料及设备
实验材料：实验2中诱导的愈伤组织
实验设备和用具：同实验2。

3.3 操作方法
A. 观察实验1愈伤组织诱导结果：统计愈伤组织诱导率；观察记载黑暗和光照条件下愈伤组织的差异，结合理论学习进行分析。
愈伤组织形成率＝愈伤组织数/接种外植体数
B. 按照实验2相同的步骤，作好无菌操作准备。
C. 将实验2中光照下诱导的愈伤组织，全部转入分化培养基上，黑暗诱导的愈伤组织一半转入分化培养基，所有转入分化培养基的愈伤组织均置于连续光照或16h/d光照，温度20－22℃条件下培养。
需要注意的是，愈伤组织的状态常常受许多因素的影响，如果转入分化培养后3－4周仍然没有芽的形成，或愈伤组织状态没有明显变化，应及时调整培养基激素浓度，更换新鲜培养基。
D. 将另黑暗下培养的另一半愈伤组织转入增殖培养基中，继续置于黑暗条件下培养，培养温度24℃。

3.4 记载内容
上次实验愈伤组织诱导结果：愈伤组织诱导率；愈伤组织状态、大小；不同光照形成的愈伤组织状态描述；污染率统计。
本次实验操作过程，接种瓶数，每瓶接种量。