Prominence nano 纳升液相色谱仪

描述

Prominence nano 纳升液相色谱仪
Prominence nano系列是一套纳升LC系统,可在纳升流量下进行精准流速的溶剂输送。按照应用不同,可以配置成1D和2D系统。
Prominence nano具备纳升流速下的高保留时间重复性,非常低的系统死体积和极低的交叉污染等特点。

Nano-Assist一维LC设置图

应用

高保留时间重复性

蛋白质组分析需要比较不同样本的色谱峰差异,而样本中又存在许多特征相似的多肽,对保留时间的重复性要求非常高。Prominence nano系统的高重复性可保证蛋白质组分析的高精数据,配置了RFC系统的LC-20AD nano可以在流速为300 nL/min获得RSD不超过0.2% 的保留时间重复性。

液相色谱仪


牛血清白蛋白(BSA)酶解样品的重复性

2维 LC的高分辨率

液相色谱仪


牛血清白蛋白(BSA)酶解样品的重复性

在蛋白质组学分析时,单一的1D反相分离不足以提供足够的色谱峰容量;所以,为了实现复杂样品的分离,需要进行2D分离以保证足够的峰容量。Prominence nano系统可以进行2D分析,结合阳离子交换和反相模式,为蛋白质组学分析提供所需的核心技术。下图为200fmol酵母蛋白质的分析图,1D分离中的未分离组分在2D中继续分离成几个组分,2D分离的峰容量大大大于1D所获得的效果。

分析条件

1维

PolysulfoethylA (50mmL.×1mmI.D.)
流动相 甲酸铵缓冲液
浓度STEP梯度
流速  40 nL/min
捕集柱 (5 mmL.×300 m I.D.)
L-column (micro)
捕集时长 5分钟
脱盐溶剂 水/蚁酸=100/0.1
脱盐流速 L/min
脱盐时长 5分钟

2维

PicoFrit (100 mmL.×75 m I.D.)
流动相 梯度洗脱
A)水/乙腈/蚁酸=98/2/0.1(v/v)  B) 水/乙腈/蚁酸=5/95/0.1(v/v)
流速 600nL/min
温度 温度
检测 LCMS-IT-TOF
样本 酵母蛋白中的蛋白
(相当于200 fmol的)

分别利用1维和2维中不同类型的柱体进行其他组合的分离模式也是可行的。在这种情况下,分离或检测方法由于使用的移动相分离模式或类型之间的相互作用,可能会有一些限制。

连接MALDI-TOFMS使用

Prominence nano系统不仅仅可以通过nano ESI接口连接LCMS使用,还可连接到配有自动点靶仪的MALDI-TOFMS仪器。为了准确分析MALDI靶的每个色谱峰,需要LC能够在1nL到1µL范围之内精确控制流速,Prominence nano系统的完全满足了此需要。

液相色谱仪


酶解BSA样品的UV色谱图(500fmol)

分析条件

检测器 UV220 nm
MonoCap for Fast-flow 快速MonoCap
 (250 mmL. × 100 µm I.D.)
流动相 1、水/乙腈/蚁酸=98/2/0.1(v/v)  B) 水/乙腈/蚁酸=5/95/0.1(v/v)
2、梯度洗脱
流速 1 µL/min
温度 环境温度
捕捉柱 ODS (1 mmL. × 0.5 mm I.D.)
点靶间隔 12 秒的点断
每点液体:200nL(不包括基质)
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