采用LAMP温扩增技术检测细菌的灵敏度和重复性

本文采用 LAMP 等温扩增技术检测细菌，对其检测灵敏度和重复性做了相关验证。

如图 1 所示，尺寸为 75 x 28 mm 的微流控芯片有多个反应井组成可用于多重检测。其中，每个芯片含有 10 或 18 个井，每个井体积约 4 ul。 

每个反应井通过自身的分配通道连接到一个公共的进样通道上。同时每个反应井通过自身分配通道连接有一个疏水通气孔。

图 1

为了防止在LAMP扩增过程中产生交叉污染，如图 2 所示，一个带扣的专用塑料外壳被用来密封芯片样品装载口和排气口。

芯片和外壳分别采用聚碳酸酯和尼龙注塑而成。

图 2

在样品加载过程中，采用移液器将反应混合物通过进样通道推到各个分配通道进而进入多个反应井中。扩增所需的引物实现被埋在反应井中。

同时，芯片内的空气通过排气孔排出，这使得所有反应井中的试剂分配均匀。

图 3

芯片和匹配的卡壳结构如图 3 所示。

一个具备18个反应井的芯片的操作流程如图 4 所示。

图 4

芯片配套的仪器重约 7kg,其尺寸为 353 x 340 x 178 mm，主要由 温控模块和成像模块组成。

样品加载完后，将芯片插入仪器上对应的四个插件槽之一。仪器中最多可同时进行四个样品检测。

图 5

温控模块由用于加热的半导体制冷器和用于温度测量的热电偶组成。

如图 5 所示，为了实时对多个芯片进行成像，采用线性平移平台来控制成像模块的水平移动。

审核编辑：刘清