燕窝中的二氧化硫、亚硫酸盐检测的应用方案

引言：

曾有媒体曝光，部分不法商家为了让燕窝更有卖相，节省人工挑毛成本，采用硫磺熏蒸方法来漂白燕窝，导致燕窝中二氧化硫有残留。当然，更有相关专业人士厦门出入境检疫中心-徐敦明博士表示，天然燕窝也可能含有微量的二氧化硫，大部分燕窝企业自检也是以10mg/kg作为限量标准。如果在燕窝加工过程中没有掌握好二氧化硫类物质的使用量，或有些企业为了追求其产品具有良好的外观色泽或延长食品包藏期限或为掩盖劣质食品，不顾标准限制，超量使用二氧化硫类添加剂，就有可能造成食品中二氧化硫的残留量超过国家标准，从而对人体健康造成一定的不良影响。使用UV-1500PC紫外可见分光光度计检测样品中的亚硝酸盐及二氧化硫效果灵敏，正确度及精密度高。

关键词：UV-1500PC紫外，分光，二氧化硫

检测依据：

GB／T5009．33—2016食品中亚硝酸盐和硝酸盐含量的测定--分光光度法

GB／T5009．34-2003食品中亚硝酸盐的测定--分光光度法

食品中亚硝酸盐和硝酸盐含量的测定——分光光度法

原理： 

试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘二胺偶合形成紫红色染料，与标准比较定量，测得亚硝酸盐的含量。硝酸盐通过镉柱还原成亚硝酸盐，测得亚硝酸盐的总量，由总量减去试剂亚硝酸盐的含量即得硝酸盐的含量。本法亚硝酸盐和硝酸盐的检出限分别为1mg／kg和1.4mg／kg。

试剂及仪器：

美析UV-1500PC紫外可见分光光度计

（1）亚铁氰化钾溶液(106g/L):称取106.0g亚铁氰化钾，用水溶解,并稀释至1 000mL。

（2）乙酸锌溶液(220g/L):称取220.0g乙酸锌,先加30mL冰乙酸溶解，用水稀释至1000mL。

（3）氨缓冲溶液(pH 9.6~9.7):量取30mL盐酸,加100mL水,混匀后加65mL氨水,再加水稀释至1000mL,混匀。调节pH至9.6~9.7。

（4）对氨基苯磺酸溶液(4 g/L):称取0.4g对氨基苯磺酸,溶于100mL 20%盐酸中,混匀,置棕色瓶中，避光保存。

（5）盐酸萘乙二胺溶液(2g/L):称取0.2g盐酸萘乙二胺,溶于100mL水中，混匀置棕色瓶中。

样品预处理：
称取5g(精确至0.001g)匀浆试样(如制备过程中加水，应按加水量折算),置于250 mL具塞锥形瓶中,加12.5mL50g/L饱和硼砂溶液,加入70C左右的水约150mL,混匀，于沸水，浴中加热15min,取出置冷水浴中冷却,并放置至室温。定量转移上述提取液至200mL容量瓶中，加入5mL 106g/L亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入5mL 220g/L乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质。加水至刻度,摇匀,放置30min,除去上层脂肪,上清液用滤纸过滤,弃去初滤液30mL,滤液备用。

亚硝酸盐的测定：

吸取40.0mL.上述滤液于50mL带塞比色管中,另吸取0.00mL、0.20mL、0.40 mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL亚硝酸钠标准使用液(相当于0.0μg、1.0μg、2.0μg、3.0μg、4.0μg、5.0μg、7.5μg、10.0μg、12.5μg亚硝酸钠),分别置于50mL带塞比色管中。于标准管与试样管中分别加入2 mL4g/L对氨基苯磺酸溶液,混匀，静置3min~5min后各加入1mL2g/L盐酸萘乙二胺溶液,加水至刻度,混匀,静置15min,用1cm比色杯,以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度,绘制标准曲线比较。同时做试剂空白。

盐酸副玫瑰苯胺光度法测定二氧化硫

原理： 

二氧化硫(或来自亚硫酸盐)被四氯汞钠吸收后，生成稳定的络合物，再与甲醛和盐酸副玫瑰苯胺作用，并经分子重排后，生成紫红色的络合物。颜色的深浅与二氧化硫的浓度成正比，可以用UV-1500PC紫外可见分光光度计进行比色测定。本方法使用于二氧化硫游离型和结合型硫酸盐残留量的测定。

试剂及仪器：

UV-1500PC紫外可见分光光度计

(1)5mol/L氢氧化钠溶液；0.5mol/L硫酸溶液；12g/L氨基磺酸铵溶液。

(2)四氯汞钠吸收液：称取13.6g氯化高汞及6g氯化钠，溶于水中并稀释至1000mL，放置过夜，过滤后备用。

(3)甲醛溶液：吸取0.55mL无聚合沉淀的36％甲醛，加水99.45mL稀释，混匀。

(4)淀粉指示液：称取1g可溶性淀粉，用少量水调成糊状，缓缓倾入100m1沸水中，随加随搅拌，煮沸，放冷备用，此溶液临用时现配。

(5)亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾[K Fe(CN) ，·3H 0]，加水溶解并稀释至100m1。

(6)乙酸锌溶液：称取22g[Zn(CH COO) ·2H20]，溶于少量水中，加入3mL冰乙酸，加水稀释至100mL。

(7)盐酸副玫瑰苯胺溶液：称取0.1gCHN Cl·4H20于研钵中，加少量水研磨使溶解并稀释至100mL。取出20mL，置于100mL容量瓶中，加盐酸溶液6mol／L，充分摇匀后使溶液由红变黄，如不变黄再滴加少量盐酸至出现黄色，再加水稀释至刻度，混匀备用(如无盐酸副玫瑰苯胺可用盐酸晶红代替)。

(8)0.1mol／L碘溶液。

(9)0.1mol／L硫代硫酸钠标准滴定溶。

(10) 二氧化硫标准储备溶液：称取0.5g亚硫酸钠，溶于200mL四氯汞钠吸收液中，放置过夜，上清液用定量滤纸过滤备用。

(11) 二氧化硫标准使用溶液：临用前将二氧化硫储备溶液以四氯汞钠吸收液稀释成每毫升含2ug二氧化硫。

样品预处理：

称取5—10g研磨均匀的样品，以少量水湿润并移人100mL容量瓶中，然后加入20mL四氯汞钠吸收液，浸泡4h以上，若上层溶液不澄清，可加入亚铁氰化钾及乙酸锌溶液各2.5mL，最后用水稀释至刻度，过滤后备用。

样品测定：

吸取0.5—5mL上述样品处理液于25mL具塞比色管中。另取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1、1.5、2mL二氧化硫标准使用液(相当于0、0.4、0.6、0.8、1.2、1.6、2、3、4ug二氧化硫)，分别置于25mL具塞比色管中。于样品及标准管中各加四氯汞钠吸收液至10mL，然后加入1mL12g／L氨基磺酸铵溶液、1m1甲醛溶液及1m1盐酸副玫瑰苯胺溶液，摇匀，放置20min。用1cm比色皿以零管调节零点，调节分光光度计于波长550nrn处测吸光度，并绘制标准曲线。

仪器参数

UV-1500PC紫外可见分光光度计

技术指标及基本参数

*波长范围： 190～1100nm

*光谱带宽： 2nm

*波长准确度：±0.5nm

*波长重现性：≤0.2nm

*透射比准确度: ±0.3% τ

*透射比重复性：0.15% τ

*杂散光：≤0.05% τ (220nm NaI，340nm NaNO2)

*稳定性： 0.001A/h（500nm预热后）

*测光方式：透过率、吸光度、浓度、能量

*波长调节：自动调节

*光度范围： -0.3～3A

*显示方式： 128*64液晶

*检测器：进口硅光二极管

*光源：进口氘灯，进口钨灯

*电源： AC 220V/50Hz或110V/60Hz

*功率： 120W

*仪器尺寸：480×350×220mm

*主机净重： 15Kg

关于美析

美析主营光谱类仪器可见分光光度计、紫外可见分光光度计、原子吸收光谱仪、超微量分光光度计、原子荧光光度计、ICP电感耦合等离子体发射光谱仪、ICP电感耦合等离子体质谱仪，目前，我们的产品已广泛应用于有机化学、无机化学、生物化学、医药、环保、冶金、石油、农业等领域。同时美析利用在产品机械结构、光学设计、电气应用和软件开发方面积累的丰富经验，结合市场的最新实际需求，近期将陆续推出一批全新的分析类仪器。

审核编辑 黄宇