神经细胞膜电位变化的荧光成像

所用相机：

ORCA-Flash4.0 V3(C13440-20CU)

成像方法：

宽场荧光

应用描述：

电压敏感的荧光蛋白定位于细胞膜上，与离子通道相偶联。神经细胞的膜电位变化会引起该蛋白荧光强弱的变化，从而使膜电位“可视化”。传统的CCD或普通高速CMOS相机由于灵敏度和帧速上限太低，往往和肉眼观察一样，分辨不出荧光信号的快速变化;该实验使用滨松Flash4.0 V3，在USB 3.0的连接方式下将帧速提高至1,0000 fps，使1 ms内的荧光变化也能够清晰的呈现出来。

# 详细描述

该实验使用胚胎期电转质粒的方式，让小鼠脑部特定类群的神经元表达电压敏感的荧光蛋白ASAP1，配合膜片钳系统对脑片中被标记的神经元给予电刺激，使其膜电位产生变化;同时利用Flash4.0 V3的超高速成像能力，捕捉荧光信号的实时变化。

1. 在512*128的ROI(region of interst)下，可以用1600 fps的帧速记录单个神经细胞胞体的膜电位变化。

 

2. 在512*8的ROI下，其帧速可以达到10000 fps。在该尺度下可以达到每个电位的Spike记录5-10个采样数据点，且其信号的信噪比仍然很好。

3. 成像系统配置：Olympus BX51WI + Hamamatsu Flash4.0 V3

审核编辑 黄宇