通过检测识别血液中生物标志物来筛查早期人类疾病是生命健康领域备受关注的重要研究方向之一。 当前,临床上常用的经典分析技术,如酶联免疫吸附试验(ELISA),由于检测灵敏度的限制通常很难检测到低丰度蛋白质生物标志物;而近些年来兴起的数字蛋白检测方法(digital ELISA)虽然能够有效检测到飞摩尔浓度级别的蛋白,但是,该项技术的实施通常涉及到专业昂贵的大型仪器,多个洗涤步骤,并且缺乏并行化处理样本的能力,这些因素阻碍了其广泛应用。
近日,浙江大学良渚实验室王永成研究员团队开发了新一代离心生成液滴的数字蛋白检测技术(CDPro),基于微通道阵列的微流控芯片,利用常规的离心机即能实现对多达数百个样本同时快速液滴生成,同时实现微量血液中蛋白的超灵敏检测。
该成果以“Highly Parallel, Wash-free, and Ultrasensitive Centrifugal Droplet Digital Protein Detection in Sub-Microliter Blood”为题,发表在英国皇家化学会期刊Lab on a Chip上,并入选为热点文章(HOT Articles)。
图1 离心液滴数字蛋白质检测(CDPro)流程示意图
研究团队开发了新一代离心生成液滴的微流控芯片,在此基础上开发了基于液滴的数字免疫PCR技术,即通过一对特异性抗体-寡核苷酸(antibody-oligo)捕获靶标蛋白,继而在DNA连接酶的作用下,将靶标蛋白检测信号转化为核酸检测信号。结合离心式液滴微流控芯片和数字免疫PCR技术,实现针对微量血浆中特定蛋白标志物的飞摩尔灵敏度检测极限。
综上所述,CDPro技术不仅具备超高的检测灵敏度和检测准确性,而且拥有样品处理通量高、操作过程简单、免清洗、用血量少、成本低等特点及优势,能够提供给普通生物医学实验室进行科学研究,以及临床上血浆中低丰度蛋白检测分析。
责任编辑:彭菁
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