荧光分光光度计常用的光源是什么 荧光测定中应该注意的主要问题

荧光分光光度计常用的光源是氙灯和镓砷化镓（GaAs）。

氙灯是荧光分光光度计中常见的光源之一。它能够提供连续的光谱，波长范围通常在190nm至900nm之间。氙灯具有高亮度、稳定性和长寿命等特点，适用于广泛的荧光分析应用。氙灯的光谱强度与波长有明显的相关性，能够较好地满足荧光测定的要求。

在某些特殊的应用中，镓砷化镓（GaAs）也被用作荧光分光光度计的光源。与氙灯不同，GaAs使用激光二极管（LD）作为激发源，具有较窄的发射谱带。GaAs在波长为780nm到905nm之间提供高亮度的激光光源，可以充分满足特定波长的荧光分析需求。

荧光测定中需要注意的一些主要问题如下：

1. 选择合适的溶剂和溶液组成：荧光测定的样品需要在溶液中进行，正确选择溶剂以及样品与溶剂的比例非常重要，以确保样品能够溶解并得到准确的测量结果。
2. 防止内部光散射和测量背景：荧光测定中的背景信号可能来自仪器和试剂的自发发光，必须通过相应的空白试验控制这些背景信号，并进行相应的背景校正。
3. 消除散射和吸收：散射是荧光测定中非常常见的问题之一，因为它会干扰到底物和产物的荧光信号。可以通过合理调整测量条件、改变反应物浓度和添加吸收剂等方法来消除或减小散射和吸收的影响。
4. 校正荧光光谱的重叠：在多成分分析中，荧光光谱的重叠可能导致测定结果的误差。针对这个问题，可以使用多元回归分析、主成分分析或者最小二乘法进行数据处理和解析，以准确获得每个组分的浓度。
5. 最佳测量条件的确定：荧光测定的灵敏度和选择性高度依赖于测量条件的优化。例如，调整激发光的波长和强度、选择合适的检测滤光片、调整样品浓度等都可能对测量结果产生重要影响，因此需要仔细考虑和优化测量条件。
6. 样品的制备和保存：荧光测定结果可能会受到样品制备过程中的温度、光照和时间等因素的影响。为减小这些影响，应该选择合适的制备方法，并且在分析过程中保持样品的稳定性。
7. 合适的仪器校准和验证：为确保荧光分光光度计的准确性和可靠性，需要对仪器进行校准和验证。这可以通过使用已知荧光强度的参考标准或标准工具进行比较和检验来完成。

总结起来，荧光分光光度计常用的光源是氙灯和镓砷化镓（GaAs）。在荧光测定中需要注意选择合适的溶剂和溶液组成、控制背景信号、消除散射和吸收、校正荧光光谱的重叠、确定最佳测量条件、样品的制备和保存以及仪器校准和验证等主要问题。