安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程

一、概述

安捷伦1260高效液相色谱仪（以下简称HPLC）是一种高效、高灵敏度的分析仪器，能够对复杂样品进行快速、准确的分离和检测。本文详细介绍了HPLC的操作规程，包括仪器的开/关机、系统检查、色谱柱安装、流动相配置、样品制备、色谱条件设置、数据处理等环节。

二、仪器开/关机

1. 开机 ：

• 确保电源插座接地良好。
• 打开电源开关，仪器自检。
• 等待自检完成，仪器进入操作界面。

2. 关机 ：

• 关闭所有模块的电源开关。
• 断开电源插座。

三、系统检查

1. 检查流动相 ：

• 确保流动相无杂质，无气泡。
• 检查流动相瓶的液位，确保足够。

2. 检查色谱柱 ：

• 确认色谱柱型号、规格与实验要求相符。

3. 检查检测器 ：

• 确保检测器清洁，无污染。

4. 检查样品瓶 ：

• 确保样品瓶干净，无交叉污染。

5. 检查废液瓶 ：

• 确保废液瓶有足够的空间容纳废液。

四、色谱柱安装

1. 拆卸色谱柱 ：

• 旋开色谱柱两端的接头。

2. 安装色谱柱 ：

• 将色谱柱一端插入柱塞，旋紧。
• 将色谱柱另一端插入检测器，旋紧。

3. 柱温控制 ：

• 设置柱温箱温度，预热至所需温度。

五、流动相配置

1. 溶剂选择 ：

• 根据实验要求选择合适的溶剂。

2. 流动相混合 ：

• 按照比例混合溶剂，确保混合均匀。

3. 脱气 ：

• 使用真空脱气或超声波脱气，去除流动相中的气泡。

六、样品制备

1. 样品溶解 ：

• 将样品溶解在适当的溶剂中。

2. 样品过滤 ：

• 使用适当孔径的滤膜过滤样品，去除颗粒物。

3. 样品稀释 ：

• 如有必要，对样品进行适当稀释。

七、色谱条件设置

1. 流速设置 ：

• 根据实验要求设置流速。

2. 柱温设置 ：

• 设置柱温箱的工作温度。

3. 检测器参数设置 ：

• 根据样品特性设置检测器的波长、灵敏度等参数。

4. 进样量设置 ：

• 设置自动进样器的进样量。

5. 运行时间设置 ：

• 设置色谱分析的总运行时间。

八、样品分析

1. 样品进样 ：

• 使用自动进样器或手动进样。

2. 色谱分析 ：

• 启动色谱分析，观察色谱图。

3. 数据处理 ：

• 使用色谱工作站软件对色谱图进行处理，得到所需的数据。

九、仪器维护

1. 色谱柱维护 ：

• 定期更换色谱柱，保持柱效。

2. 检测器维护 ：

• 定期清洁检测器，确保检测精度。

3. 流动相过滤 ：

• 定期更换流动相过滤器，防止堵塞。

4. 系统清洗 ：

• 定期对系统进行清洗，去除残留物。

十、安全注意事项

1. 操作安全 ：

• 操作人员应接受专业培训，熟悉操作规程。

2. 化学安全 ：

• 使用化学品时，应遵守实验室安全规程。

3. 电气安全 ：

• 确保仪器接地良好，避免电气事故。

4. 废液处理 ：

• 按照规定处理废液，避免环境污染。