微流控电阻抗技术检测蜜蜂孢子

描述

倘若地球上的蜜蜂消失了,人类或要消失?这句话不是小编说的,是下图这个老头儿说的。小编也绝没有要危言耸听的意思。

这个老头儿在他的绝密手记上是这么说的:人类有可能在2060年灭绝;倘若地球上的蜜蜂全部消失了,人类或许也要消失了,甚至有可能只剩下不到4年的时间。

好吧,说什么我都不相信他说的2060年人类就灭绝的事情。不过认真地说,如果没有蜜蜂授粉,地球上的万物应该都会受到影响吧。难道要靠苍蝇么?

内生孢子又称芽孢,主要来源于寄生在昆虫的消化道上皮细胞中的微孢子虫,典型的有蜜蜂肠道微孢子虫和家蚕微孢子虫。微孢子虫病感染传播速度快,易出现群体体质衰弱甚至死亡,因此需要对昆虫肠道中的内生孢子进行检测,以达到对微孢子虫病的防控和判断最佳治疗期。

目前,实验室对于蜜蜂肠道内生孢子的计数只能通过显微镜计数,其过程费时费力,且蜜蜂肠道内生孢子粒径较小,仅2~3μm,不同人员间镜检结果偏差较大,且浓度偏高时镜检尤其困难。卓微科技定制版JIMBIO CL 细胞计数仪可替代显微镜镜检,检测浓度范围为1e5~5e6,能够提高计数效率,给出准确客观的计数结果。

下面是整个蜜蜂肠道内生孢子的计数案例

材料:感染微孢子虫病蜜蜂 、PBS(1X)

孢子悬液纯化制备:1、取蜜蜂的腹部,置于放入蒸馏水及研磨粉的研钵中研磨。2、研磨均匀后转入10ml离心管中,500rpm低速离心3min。3、上清转入新的10ml离心管,弃沉淀,2000rpm高速离心10min。4、弃上清,用清水重新悬浮沉淀,4000rpm离心10min。5、取沉淀,用1mlPBS溶解沉淀,4℃保存备用。

显微镜镜检图:

结果与分析:

微流控

从图1、图2可以看出,蜜蜂肠道内生孢子比较小,且浓度较高的时候,样本平铺在血球计数板上非常密集,显微镜下计数困难。

从表1中可以看出,定制版JIMBIO-CL测试结果与计数板统计相比,平均浓度基本一致,由于定制版JIMBIO-CL为10微升样本全计数,测试结果波动较小,稳定性明显优于进口血球计数板。

注意事项:1、只能使用PBS(1X)稀释待测蜜蜂孢子样本;2、加样前需充分混匀待测样本(可根据样本总量选择不同规格液枪吹打);3、为保证检测结果的稳定性,待检测样本总量不要低于100微升。

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