以下是液相色谱仪（HPLC）的标准操作步骤（中文版），适用于大多数常规分析，具体操作请以仪器说明书和分析方法为准：

一、开机前准备

1. 检查溶剂
   • 确认流动相足量、无沉淀、已过滤（0.45 μm滤膜）并超声脱气。
   • 水相流动相需当日配制（防止长菌）。
2. 检查废液桶
   • 清空废液桶，避免溢出。
3. 安装色谱柱
   • 根据分析方法选择合适色谱柱（注意流向箭头）。
   • 新柱需用保存液过渡（如甲醇柱需先过渡到流动相）。
4. 准备样品
   • 样品经0.22 μm滤膜过滤或离心，避免堵塞。

二、开机与平衡

1. 启动系统
   • 开启电源：泵→检测器→自动进样器→柱温箱→工作站。
2. 排气泡
   • 打开泵旁路阀，启动泵，用注射器抽吸管路至无气泡（或使用仪器排气程序）。
3. 设置参数
   • 工作站设置：流速、柱温、检测波长（如254 nm）、流动相比例（例：甲醇:水=60:40）。
4. 平衡系统
   • 以初始流速（如1.0 mL/min）冲洗色谱柱，直至基线平稳（通常需20-30分钟）。

三、进样分析

1. 进样前检查
   • 确认基线稳定、压力波动＜5%。
2. 编写序列
   • 在工作站设置样品瓶位置、进样体积（如10 μL）、分析方法名称。
3. 执行进样
   • 将样品瓶放入进样盘，启动序列（自动进样）或手动切换进样阀。
4. 实时监控
   • 观察压力曲线、基线信号是否异常（如压力骤升可能堵塞，波动大可能气泡）。

四、关机与维护

1. 冲洗系统
   • 分析结束：先用高水相流动相（如90%水）冲洗15分钟，再用有机相（如甲醇或乙腈）冲洗30分钟。
2. 停泵关机
   • 调流速至0，关闭泵→检测器→其他模块→工作站→总电源。
3. 色谱柱保存
   • 反相柱：保存在纯甲醇或乙腈中；正相柱：保存在正己烷中。
4. 登记与清洁
   • 填写仪器使用记录，清理台面，处理废液。

注意事项

• 避免高压冲击：启动泵前确保管路畅通，不得突然改变高比例有机相。
• 盐析预防：水相流动相不可直接切换至高有机相，需梯度过渡。
• 异常处理：压力超过上限10%或基线漂移严重时，立即暂停排查（可能柱堵或漏液）。
• 耗材更换：定期更换在线过滤器滤芯、泵密封垫。

? 关键提示：不同仪器型号操作略有差异，首次使用务必参考具体仪器操作手册！复杂方法（如梯度洗脱）需提前验证方法参数。