液相色谱仪检测器的类型
液相色谱仪检测器的类型 利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,而后分析鉴定的仪器。
液相色谱仪(HPLC)有多种检测器,各有其特点和适用场景。以下是一些主要类型的检测器:
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紫外-可见光检测器 (UV-Vis Detector, UV):
- 原理: 检测样品在紫外或可见光波长(通常在190-800 nm)对特定波长的光吸收程度(吸光度)。
- 特点: 最常用、应用最广的检测器之一。灵敏度高,线性范围宽,对流动相的脉动和温度变化不敏感。适用于具有生色团(能吸收紫外或可见光的基团)的化合物。
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二极管阵列检测器 (Diode Array Detector, DAD / PDA):
- 原理: 利用二极管阵列探测器,在一次进样过程中同时采集样品在整个紫外-可见光波长范围内的吸收光谱。
- 特点: 是UV检测器的升级版。优点在于能获得三维色谱图(时间-波长-吸光度),可以同时进行多波长检测、峰纯度评估和光谱库检索。特别适用于复杂体系中峰鉴定、杂质检测和峰纯度确认。
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荧光检测器 (Fluorescence Detector, FLD):
- 原理: 检测样品吸收激发光后发射出的荧光强度。
- 特点: 灵敏度通常比UV检测器高几个数量级(选择性高),专一性强(只有能产生荧光的物质才被检测)。适用于具有天然荧光或可通过衍生化产生荧光的化合物(如多环芳烃、维生素、氨基酸、某些药物和代谢物)。
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示差折光检测器 (Refractive Index Detector, RID):
- 原理: 检测样品流经流通池时引起的折射率变化。
- 特点: 通用型检测器(对大多数化合物都有响应),不需要样品具有特定官能团(如生色团或荧光团)。但灵敏度相对较低,对温度波动极为敏感,不适合梯度洗脱(因为流动相成分变化会导致基线严重漂移)。常用于糖类、高分子聚合物、表面活性剂等的分析。
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蒸发光散射检测器 (Evaporative Light Scattering Detector, ELSD):
- 原理: 将色谱柱流出的流动相雾化,蒸发掉挥发性成分(流动相),留下的不挥发性样品颗粒通过光束时产生散射光,检测散射光强度。
- 特点: 接近通用型的质量型检测器。对无紫外吸收、无荧光或弱荧光的物质(如糖类、脂类、聚合物、表面活性剂、类固醇等)特别有效。响应与样品质量直接相关(理论上对所有不挥发物有响应),受样品光学性质影响小,可兼容梯度洗脱。灵敏度通常高于RID。缺点是对流动相有一定的限制(必须是可挥发的),且相对破坏性。
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质谱检测器 (Mass Spectrometry Detector, MS或LC-MS):
- 原理: 将色谱分离后的组分引入质谱仪进行离子化,根据质荷比进行分离和检测。
- 特点: 检测能力最强的检测器,能提供化合物的分子量和结构信息,具有极高的选择性和灵敏度,常用于定性和定量分析(尤其是痕量分析和复杂基质)。可以连接多种质谱技术(单四极杆、三重四极杆、离子阱、飞行时间等)。是最主流的分析工具之一,但仪器昂贵,维护复杂。常用于药物分析、代谢组学、蛋白组学、食品安全、环境分析等。
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电化学检测器 (Electrochemical Detector, ECD):
- 原理: 检测在流通池电极上因氧化或还原反应而产生的电流变化。
- 类型:
- 安培检测器: 最常用,电极电位恒定,测量氧化或还原电流。
- 库仑检测器: 电极电位可变(扫描或脉冲),可定性。
- 电导检测器: 测量溶液电导率变化(主要用于离子色谱)。
- 特点: 灵敏度非常高(尤其安培检测器),选择性好,适用于具有电化学活性的物质(如儿茶酚胺类神经递质、酚类、醌类、某些药物及其代谢物、某些含硫化合物等)。流动相通常需要电解支持。
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电喷雾检测器 (Corona Charged Aerosol Detector, CAD):
- 原理: 先将流出物雾化,溶剂蒸发后,用带电氮气使残留的固体颗粒带上正电荷,然后检测带电颗粒产生的电流(与颗粒数量和质量大致成正比)。
- 特点: 也是一种通用型质量检测器,响应不依赖于样品的化学性质(有荧光或紫外吸收均可),对所有非挥发性/半挥发性物质均有响应。灵敏度高(介于UV和ELSD之间,接近甚至优于FLD),响应一致性好(对不同化合物的响应因子较接近),可兼容梯度洗脱。应用类似于ELSD,但在某些方面有优势(响应一致性更好)。
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化学发光检测器 (Chemiluminescence Detector, CLD):
- 原理: 在柱后通过化学反应使目标物或其衍生物产生化学发光,检测发光强度。
- 特点: 极高的灵敏度(甚至超过荧光检测器),结构简单。主要适用于痕量金属离子(如钴、铁、铬等)的分析(常联用离子色谱),或在特定化学发光反应体系中的某些有机物(如鲁米诺体系)。
总结: 选择哪种检测器取决于被分析物的性质(是否有紫外吸收、荧光、电化学活性、是否易挥发等)、检测灵敏度要求、样品基质的复杂性、是否需要进行结构鉴定、分析方法成本以及是否需进行梯度洗脱等因素。没有一种“万能”的检测器,最常用的是UV/DAD、MSD和FLD。质谱检测器提供最全面的信息,应用越来越广泛。通用型检测器(如RID、ELSD、CAD)适用于缺乏特定响应基团的化合物。
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